無菌凈化實(shí)驗(yàn)室生物安全柜是為操作原代培養(yǎng)物、菌毒株以及診斷性標(biāo)本等具有感染性的實(shí)驗(yàn)材料時(shí),用來保護(hù)操作者本人、實(shí)驗(yàn)室環(huán)境以及實(shí)驗(yàn)材料,使其避免暴露于上述操作過程中可能產(chǎn)生的感染性氣溶膠和濺出物而設(shè)計(jì)的。但是也有幾個(gè)常見問題是需要注意的:
1、紫外燈
生物安全柜中不需要紫外燈。如果使用紫外燈的話,應(yīng)該每周進(jìn)行清潔,以除去可能影響其殺菌效果的灰塵和污垢。
2、明火
在生物安全柜內(nèi)所形成的幾乎沒有微生物的環(huán)境中,應(yīng)避免使用明火。
3、溢出
實(shí)驗(yàn)室中要張貼如何處理溢出物的實(shí)驗(yàn)室操作規(guī)則,每一位使用實(shí)驗(yàn)室的成員都要閱讀并理解這些規(guī)程。
4、認(rèn)證
在安裝時(shí)以及每隔一定時(shí)間以后,應(yīng)由有資質(zhì)的專業(yè)人員按照生產(chǎn)商的說明對每一臺(tái)生物安全柜的運(yùn)行性能以及完整性進(jìn)行認(rèn)證,以檢查其是否符合國家及國際的性能標(biāo)準(zhǔn)。
5、清潔和消毒
由于剩余的培養(yǎng)基可能會(huì)使微生物生長繁殖,因此在實(shí)驗(yàn)結(jié)束時(shí),包括儀器設(shè)備在內(nèi)的生物安全柜里的所有物品都應(yīng)清除表面污染,并移出安全柜。
6、清除污染
生物安全柜在移動(dòng)以及更換過濾器之前,必須清除污染。
7、個(gè)體防護(hù)裝備
在使用生物安全柜時(shí)應(yīng)穿著個(gè)體防護(hù)服。
8、警報(bào)器
可以在兩種警報(bào)器中選擇一種來裝備生物安全柜。
分類
生物安全柜可分為一級(jí)、二級(jí)和三級(jí)三大類以滿足不同的生物研究和防疫要求。
一級(jí)生物安全柜可保護(hù)工作人員和環(huán)境而不保護(hù)樣品。氣流原理和實(shí)驗(yàn)室通風(fēng)櫥一樣,不同之處在于排氣口安裝有HEPA過濾器。所有類型的生物安全柜都在排氣和進(jìn)氣口使用HEPA過濾器。一級(jí)生物安全柜本身無風(fēng)機(jī),依賴外接通風(fēng)管中的風(fēng)機(jī)帶動(dòng)氣流,由于不能對試驗(yàn)品或產(chǎn)品提供保護(hù),目前已較少使用。
二級(jí)生物安全柜是目前應(yīng)用尤為廣泛的柜型。與Ⅰ級(jí)生物安全柜一樣,Ⅱ級(jí)生物安全
柜也有氣流流入前窗開口,被稱作“進(jìn)氣流",用來防止在微生物操作時(shí)可能生成的氣溶膠從前窗逃逸。與Ⅰ級(jí)生物安全柜不同的是,未經(jīng)過濾的進(jìn)氣流會(huì)在到達(dá)工作區(qū)域前被進(jìn)風(fēng)格柵俘獲,因此試驗(yàn)品不會(huì)受到外界空氣的污染。Ⅱ級(jí)生物安全柜的一個(gè)*之處在于經(jīng)過HEPA過濾器過濾的垂直層流氣流從安全柜頂部吹下,被稱作“下沉氣流"。下沉氣流不斷吹過安全柜工作區(qū)域,以保護(hù)柜中的試驗(yàn)品不被外界塵?;蚣?xì)菌污染。
按照NSF49的中的規(guī)定,二級(jí)生物安全柜依照入口氣流風(fēng)速、排氣方式和循環(huán)方式可分為4個(gè)級(jí)別:A1型,A2型(原B3型),B1型和B2型。所有的二級(jí)生物安全柜都可提供工作人員、環(huán)境和產(chǎn)品的保護(hù)。
A1型安全柜前窗氣流速度最小量或測量平均值應(yīng)至少為0.38m/s。70%氣體通過HEPA過濾器再循環(huán)至工作區(qū),30%的氣體通過排氣口過濾排除。A2型安全柜前窗氣流速度最小量或測量平均值應(yīng)至少為0.5m/s。70%氣體通過HEPA過濾器再循環(huán)至工作區(qū),30%的氣體通過排氣口過濾排除。A2型安全柜的負(fù)壓環(huán)繞污染區(qū)域的設(shè)計(jì),阻止了柜內(nèi)物質(zhì)的泄漏。
二級(jí)B型生物安全柜均為連接排氣系統(tǒng)的安全柜。連接安全柜排氣導(dǎo)管的風(fēng)機(jī)連接緊急供應(yīng)電源,目的在斷電下仍可保持安全柜負(fù)壓,以免危險(xiǎn)氣體泄漏如實(shí)驗(yàn)室。其前窗氣流速度最小量或測量平均值應(yīng)至少為0.5m/s(100fpm)。B1型70%氣體通過排氣口HEPA過濾器排除,30%的氣體通過供氣口HEPA過濾器再循環(huán)至工作區(qū)。B2型為全排型安全柜,無內(nèi)部循環(huán)氣流,可同時(shí)提供生物性和化學(xué)性的安全控制。
三級(jí)生物安全柜是為4級(jí)實(shí)驗(yàn)室生物安全等級(jí)而設(shè)計(jì)的,是高安全防護(hù)等級(jí)的安全柜。柜體*氣密,全排放式,所有氣體不參與循環(huán),工作人員通過連接在柜體的手套進(jìn)行操作,俗稱手套箱(Golvebox),試驗(yàn)品通過雙門的傳遞箱進(jìn)出安全柜以確保不受污染,適用于高風(fēng)險(xiǎn)的生物試驗(yàn)。
在允許循環(huán)化學(xué)氣體的操作條件下,可以使用外接排放管道蓋(ExhaustCollar)的A2型二級(jí)生物安全柜。排放管道蓋與一般硬管不同的是有可吸入空氣的進(jìn)氣孔;排放管道蓋與外排管道連接,然后接到一個(gè)外排風(fēng)機(jī)。排放管道蓋上的進(jìn)氣孔對于A2型二級(jí)生物安全柜通過內(nèi)置風(fēng)機(jī)保持進(jìn)氣流和下沉氣流的平衡至關(guān)重要。如果使用密封的外接風(fēng)管,進(jìn)氣流將會(huì)過強(qiáng)可能導(dǎo)致安全柜對產(chǎn)品的保護(hù)實(shí)效;而排放管道蓋上的進(jìn)氣孔可以從室內(nèi)吸入空氣,而不會(huì)影響安全柜內(nèi)的氣流平衡。此條件只適用于微量有毒化學(xué)物質(zhì)。
如果不允許循環(huán)化學(xué)氣體,則必須使用裝備硬管的B2型二級(jí)生物安全柜。由于B型安全柜不是獨(dú)立平衡系統(tǒng),它的內(nèi)置風(fēng)機(jī)只能制造下沉氣流,安全柜依賴外排風(fēng)機(jī)制造進(jìn)氣流。這種型號(hào)的安全柜在安裝和維護(hù)時(shí)會(huì)較為復(fù)雜,因?yàn)橥馀棚L(fēng)機(jī)必須與內(nèi)置風(fēng)機(jī)保持平衡,否則將導(dǎo)致對操作人員或產(chǎn)品的安全性能的失效。
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